產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
福林酚試劑(Folin & Ciocalteu's Phenol Reagent)，即福林酚試劑盒中的試劑II，也就是福林酚B液或乙液，也稱福林酚蛋白檢測(cè)試劑、福林酚蛋白測(cè)定試劑或福林酚蛋白定量試劑，常用于Lowry法測(cè)定蛋白濃度，也用于總酚類的定量[1,2]。需要特別注意的是本產(chǎn)品為常規(guī)的1N福林酚試劑,是2N高濃度福林酚試劑濃度的一半。
蛋白濃度測(cè)定有多種方法，如BCA法、Bradford法、Lowry法和雙縮脲法等。Lowry法，又名Folin-Phenol法，操作簡(jiǎn)單，為蛋白質(zhì)測(cè)定最經(jīng)典的高靈敏度方法之一。Lowry法檢測(cè)原理與雙縮脲法相同，但前者在后者的基礎(chǔ)上加入了福林酚試劑，極大地增加了顯色量，從而顯著提高了檢測(cè)靈敏度。
Lowry法檢測(cè)的基本原理如下：蛋白質(zhì)分子含有與雙縮脲相似的肽鍵，在堿性條件下，與銅離子反應(yīng)，結(jié)合生成蛋白質(zhì)-銅絡(luò)合物。加入福林酚試劑后，試劑中的磷鉬酸鹽-磷鎢酸鹽被蛋白質(zhì)-銅絡(luò)合物所含的酪氨酸和色氨酸等還原，形成深藍(lán)色磷鉬藍(lán)和磷鎢藍(lán)混合物，產(chǎn)生550-750nm之間提高吸光度的色原體，顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比，故可用比色的方法測(cè)定蛋白質(zhì)的含量。在不存在銅離子的情況下，顏色深淺主要取決于蛋白質(zhì)中酪氨酸和色氨酸的含量，在較小程度上由半胱氨酸和組氨酸決定。銅離子對(duì)酪氨酸、色氨酸或組氨酸的顏色形成沒(méi)有影響，但會(huì)減少半胱氨酸導(dǎo)致的顏色形成[3]。一般情況下，750nm或660nm處的吸光度用于定量較低的蛋白質(zhì)濃度，而550nm處的吸光度用于定量更高的蛋白質(zhì)濃度。
本試劑不含苯酚，但可與酚類、非酚類還原物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，形成分光光度法可檢測(cè)的發(fā)光原。
本試劑為澄清的淡黃色到深黃色或者淡黃綠色到深黃綠色的即用型試劑，濃度為1N ± 0.1或1mol/L ± 0.1。
保存條件：
室溫避光保存，一年有效。
注意事項(xiàng)：
若福林酚試劑開(kāi)封過(guò)久，由黃色變?yōu)榫G色，可加入幾滴液溴，稍加煮沸，試劑恢復(fù)至原色即可使用。
待測(cè)樣品中若含有酚類、檸檬酸和巰基化合物，會(huì)對(duì)福林酚試劑的還原反應(yīng)有干擾。
福林酚僅在酸性條件下穩(wěn)定，但磷鉬酸鹽-磷鎢酸鹽還原反應(yīng)條件為pH10。故加入福林酚試劑后請(qǐng)立即混勻，以防磷鉬酸-磷鎢酸鹽被破壞，顯色程度減弱。
Lowry法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度顯色受待測(cè)樣品中的酪氨酸、色氨酸含量影響，標(biāo)準(zhǔn)曲線不是嚴(yán)格的直線形式。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。
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